Si të shkripni proteinat?

Si të shkripni proteinat?
Si të shkripni proteinat?
Anonim

Ju gjithashtu mund të çkriponi kampionin tuaj me ultrafiltrim në 1 të dhjetën e vëllimit të mëparshëm, që hollohet përsëri dhe përsëritni hapin UF. Metoda më e mirë për shkripëzimin është çkripëzimi me anë të filtrimit me xhel kundër tamponit 50 mM, sesa ultrafiltrimi (klasik, jo centrifugal).

Çfarë është shkripëzimi në pastrimin e proteinave?

Shkripëzimi përdoret për të hequr kripërat nga tretësira proteinike, fenol ose nukleotide të papërfshira nga acidet nukleike ose reagjentë të tepërt ndërlidhës ose etiketues nga proteinat e konjuguara.

Si i pastroni proteinat?

Në pastrimin e proteinave me shumicë, një hap i parë i zakonshëm për izolimin e proteinave është reshjet me sulfat amoniumi (NH4) 2SO4. Kjo kryhet duke shtuar sasi në rritje të sulfatit të amonit dhe duke mbledhur fraksione të ndryshme të proteinave të precipituara. Më pas, sulfati i amonit mund të hiqet duke përdorur dializë.

Si i ruani proteinat e shkëmbimit në tampon?

Megjithatë,

Shkëmbimi i buferit kryhet duke së pari duke ekuilibruar me rrëshirën e kolonës me tampon ku kampioni duhet të përfundojë. Në të dyja rastet, përbërësit e tamponit që e bartin kampionin në kolona do të zëvendësohet nga zgjidhja me të cilën kolona është para-ekuilibruar.

Cila nga teknikat e mëposhtme të kromatografisë mund të aplikohet për shkripëzimin e proteinave?

Siç u përmend më lart, filtrimi me xhel mund të përdoret në mënyrë efektive për proteinatshkripëzimi dhe realizohet duke e ekuilibruar fillimisht kolonën e filtrimit të xhelit me ujë. Megjithatë, shkëmbimi i tamponit realizohet duke ekuilibruar fillimisht rrëshirën e kolonës me tamponin e synuar.

Recommended: