Sa më e madhe të jetë pesha molekulare, aq më e gjatë është spiralja dhe aq më ngadalë shkon molekula. Pra, elektroforeza + SDS ndahet në bazë të peshës molekulare, jo në bazë të ngarkesës amtare. Shënim i rëndësishëm: Proteinat me të njëjtën gjatësi zakonisht nuk mund të ndahen me elektroforezë xhel + SDS.
Si i ndani proteinat me të njëjtën peshë molekulare?
Centrifugimi, elektroforeza dhe kromatografia janë teknikat më të zakonshme për pastrimin dhe analizimin e proteinave. Centrifugimi ndan proteinat bazuar në shkallën e tyre të sedimentimit, e cila ndikohet nga masa dhe forma e tyre.
Cilat teknika ndajnë proteinat në bazë të tarifës?
Proteinat mund të ndahen në bazë të ngarkesës së tyre neto nga kromatografia e shkëmbimit të joneve. Nëse një proteinë ka një ngarkesë neto pozitive në pH 7, ajo zakonisht do të lidhet me një kolonë rruazash që përmbajnë grupe karboksilate, ndërsa një proteinë e ngarkuar negativisht jo (Figura 4.4).
Cila nga teknikat e mëposhtme është më e përshtatshme për të ndarë proteinat në bazë të peshës molekulare?
Metodat e kromatografisë të bazuara në ndarje janë shumë efektive në ndarjen dhe identifikimin e molekulave të vogla si aminoacide, karbohidrate dhe acide yndyrore. Megjithatë, kromatografitë e afinitetit (d.m.th. kromatografia e shkëmbimit të joneve) janë më efektive në ndarjen e makromolekulave si acide nukleike dhe proteina.
Cili lloj kolonekromatografia i ndan proteinat në bazë të peshës molekulare?
Kromatografia e filtrimit me xhel (GF) ndan proteinat vetëm në bazë të madhësisë molekulare. Ndarja arrihet duke përdorur një matricë poroze në të cilën molekulat, për arsye sterike, kanë shkallë të ndryshme aksesi -- d.m.th., molekulat më të vogla kanë akses më të madh dhe molekulat më të mëdha përjashtohen nga matrica.
