Antrupat e kontrollit të ngarkimit janë kontrolle të rëndësishme pasi ato tregojnë ngarkesën e barabartë të mostrave në të gjitha pusetat. Kontrollet e ngarkimit tregojnë gjithashtu transferimin e duhur të proteinave në membranë gjatë procesit western blotting. Kontrollet e ngarkimit janë zakonisht proteina me shprehje të lartë dhe të kudondodhur.
Çfarë bën një kontroll ngarkimi?
Një kontroll ngarkues është një proteinë e përdorur si kontroll në një eksperiment Western blotting. … Ato përdoren për t'u siguruar që proteina të jetë ngarkuar në mënyrë të barabartë nëpër të gjitha puset.
Pse përdorim një kontroll ngarkimi në Western blot?
Kontrollet e ngarkimit kanë një rol të dytë si kontroll në western blots. Ato mund të përdoren për të kontrolluar nëse ka pasur edhe transferim nga xheli në membranë në të gjithë xhelin. Kjo është e domosdoshme kur bëhen krahasime të niveleve të shprehjes së proteinave ndërmjet mostrave.
Si e përdorni kontrollin e ngarkimit në Western blot?
Sinjalet nga kontrollet e ngarkimit përdoren zakonisht për të normalizuar sinjalet nga proteinat me interes. Për të përdorur një kontroll ngarkues për këto qëllime, zbulimi me antitrupin e proteinës së kontrollit dhe antitrupin eksperimental duhet të bëhet në të njëjtin blot. Një shumëllojshmëri proteinash të ndryshme përdoren si kontrolle ngarkimi.
Pse përdoret aktina si një kontroll ngarkimi?
Beta-aktina, zakonisht përdoret si një kontroll ngarkimi për Western Blot nënormalizoni nivelet e proteinave të zbuluara duke konfirmuar që ngarkimi i proteinave është i njëjtë në të gjithë xhelin.
