Të dhënat e densitometrisë të krijuara për Western blots përdoren zakonisht për të krahasuar bollëkun e proteinave midis mostrave. … Të dhënat e densitometrisë jolineare u vëzhguan kur blotet Western u zbuluan duke përdorur fluoreshencë infra të kuqe ose kimilumineshencë, dhe në kushte të ndryshme SDS-PAGE.
Çfarë është analiza densitometrike?
Densitometria është matja sasiore e densitetit optik në materialet e ndjeshme ndaj dritës, si letra fotografike ose filmi fotografik, për shkak të ekspozimit ndaj dritës.
Si e përdorni densitometrinë në imazhin J?
Densitometri duke përdorur ImageJ
- Klikoni në qendër të katrorit dhe tërhiqeni në korsinë tjetër. …
- Për korsinë e fundit, përsëritni procedurën, por shtypni Ctrl dhe 3 për të vendosur korsinë e fundit. …
- Përdorni mjetin e linjës për të vizatuar linjat për të eliminuar sfondin e korsisë nga llogaritjet. …
- Shko te: Analyse→ Gels→ Label Peaks për të marrë raportin.
Si i analizoni rezultatet e western blot?
Vërteto mjetet e tua të përcaktimit sasior . Për shembull, kryeni një blot ku korsitë janë të ngarkuara me 20 µg, 15 µg dhe 10 µg proteina totale. Pas analizës, sasia relative e brezave të synuar duhet të jetë 2, 1,5 dhe 1. Provoni mjete dhe cilësime të ndryshme sasiore derisa të mund të riprodhoni me besueshmëri rezultatet e sakta.
Si e përcaktoni sasinë e një western blot?
Hapi 1: Përcaktoni sfondin e zbriturdendësia e proteinës suaj të interesit (PI) dhe kontrolli normalizues (NC). Hapi 2: Identifikoni NC që ka vlerën më të lartë të densitetit. Hapi 3: Ndani të gjitha vlerat NC me vlerën më të lartë të densitetit NC për të marrë një vlerë relative NC.
