Produkti i tretjes së kufizimit mund të ruhet lehtësisht në -20 C. Në 4 C do të ishte mirë, por për t'u siguruar që nuk ka aktivitet dhe asnjë aktivitet ylli është rekomandohet ta mbani në -20 C.
Si e ruani ADN-në e tretur?
Provoni të ruani fetën e xhelit në frigorifer gjatë natës, ose madje ta shkrini fetën në tampon dhe ta ngrini në -20°C ose -80°C. Degradimi i ADN-së do të ndodhë me të njëjtën shpejtësi dhe në të njëjtat kushte si ADN-ja e tretshme, prandaj përdorni një temperaturë më të ftohtë për ruajtje më të gjatë.
Çfarë do të thotë që një plazmid të tretet?
ADN-ja plazmidike e pastruar tretet me 1 ose më shumë enzima kufizuese (RE) të zgjedhura për të dhënë një model të dallueshëm të brezit të ADN-së që zgjidhet lehtësisht me elektroforezë. … Zakonisht zgjidhen enzimat kufizuese që prehen brenda vendit të shumëfishtë të klonimit (MCS) dhe rezultojnë në një model diagnostikues prej 2-5 brezash lehtësisht për t'u zgjidhur.
Si i ruani plazmidet e linearizuara?
Nëse jeni të shqetësuar për efektet në rrjedhën e poshtme të TE, ruajeni ADN-në në një përqendrim më të lartë dhe holloni kur nevojitet, ose përdorni "TE të ulët" që është 10 mM Tris / 0,1 mM EDTA. kur ADN-ja ose ARN-ja është e pastër, ajo mund të ruhet në -20C për shumë muaj pa asnjë degradim.
Sa kohë mund ta mbani kufizimin e tretjes?
Pro-Tip Në varësi të aplikimit dhe sasisë së ADN-së në reagim, koha e inkubacionit mund të variojë nga 45 minuta deri në një natë. Për tretje diagnostikuese, shpesh mjaftojnë 1-2 orë. Për tretjet me >1 μg ADN të përdorur për klonim, rekomandohet që të treteni për të paktën 4 orë.
