Megjithatë, kur spektrat e emetimit mbivendosen, mund të zbulohet fluoreshenca nga më shumë se një fluorokrom. Për të korrigjuar këtë mbivendosje spektrale, përdoret një proces i kompensimit të fluoreshencës. Kjo siguron që fluoreshenca e zbuluar në një detektor të veçantë rrjedh nga fluorokromi që po matet.
Pse kemi nevojë për kompensim në citometrinë e rrjedhës?
Kërkohet kompensim për një eksperiment të citometrisë rrjedhëse për shkak të fizikës së fluoreshencës. Një fluorokrom ngacmohet dhe lëshon një foton në një sërë gjatësi vale. Disa nga këto fotone derdhen në një detektor të dytë, duke bërë që mostrat e vetme të ngjyrosura të duken dyfish pozitive.
Cili është qëllimi kryesor i përdorimit të një qelize kompensuese?
Qëllimi kryesor është të lejojë matjen e fluoreshencës së vërtetë në kanalin primar të kontaminuar nga derdhja nga fluoroforet fqinje. Prandaj, kompensimi korrigjon për "shkeljen" e fluoreshencës midis fluoroforeve. Megjithatë, ai nuk është i përsosur dhe nuk mund të rregullojë të gjitha efektet e padëshirueshme.
Çfarë është matrica e kompensimit?
Një matricë kompensimi është llogaritet duke përdorur skedarë kontrolli fluoreshente me një ngjyrë që janë mbledhur në ImageStream ose FlowSight me të gjitha kanalet e mbledhura dhe në mungesë të ndriçimit të fushës së ndritshme ose SSC.
Çfarë është kompensimi spektral?
Përdorimi i spektritkompensimi do të thotë që sinjali nga detektorë jo parësorë përdoret ende për të përmirësuar sinjalin e vërtetë të shënuesve ku është e mundur. Mostrat e kontrollit primar përdoren për emërtimin e parametrave. … Mostrat e përdorura për detektorët parësorë ndihmojnë gjithashtu në emërtimin e këtyre parametrave sipas kompensimit spektral.