Në vitet e kaluara, Coriell përdori të gjithë serumin e inaktivuar nga nxehtësia për kulturat e tij qelizore për të çaktivizuar proteinën e komplementit që gjendet në serumin e të porsalindurve të viçit. Meqenëse kemi ndryshuar në serum të fetusit të gjedhit, zbulojmë se inaktivizimi i nxehtësisë është nuk është i nevojshëm për shumicën e linjave qelizore.
Sa kohë e ngrohni FBS-në e çaktivizuar?
Protokolli i mëposhtëm sugjerohet për inaktivizimin e nxehtësisë së serumit të gjedhit të fetusit (FBS). FBS nxehet në 56±2°C për 30±2 minuta në një banjë me ujë të trazuar. Inaktivizimi i nxehtësisë (HI) – një proces me anë të të cilit FBS mbahet në një temperaturë prej 56±2° për 30±2 minuta.
Pse është i nevojshëm çaktivizimi i nxehtësisë për FBS përpara përdorimit?
Një trajtim i zakonshëm i FBS është inaktivizimi i nxehtësisë, ku FBS nxehet në 56°C për 30 minuta në një banjë uji me lëkundje të herëpashershme. Qëllimi është të çaktivizohet çdo komponent i sistemit të komplementit që është i pranishëm në FBS [24], dhe frenuesit e tjerë potencialë të panjohur të rritjes qelizore.
Pse keni nevojë të ngrohni serumin inaktiv?
Objektivi i inaktivizimit të nxehtësisë është të shkatërrojë aktivitetin e komplementit në serum pa ndikuar në karakteristikat nxitëse të rritjes të produktit. Heqja e aktivitetit të komplementit nga serumi nuk kërkohet për shumicën e kulturave qelizore, por mund të jetë e nevojshme për kulturat që janë të ndjeshme ndaj aktivitetit të komplementit.
Si e ruani FBS të çaktivizuar nga nxehtësia?
Mbroni FBS të shkrirë dhe serume të tjera me ftohje të sigurt dhemagazinimit. Përdorni menjëherë serumin e shkrirë. FBS e lëngët dhe serumet e tjera mund të ruhen në frigorifer (2 deri në 8 °C) deri në katër javë.